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　　以下是關(guān)于?人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71) ELISA試劑盒?的實(shí)驗(yàn)使用說明書綜合指南，整合了多個(gè)高可信度來源的操作要點(diǎn)和注意事項(xiàng)?：

　　BS-1497 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理?

　　采用雙抗體夾心法：

　　包被抗體?：微孔板預(yù)包被抗人TFR/CD71抗體?。

　　結(jié)合反應(yīng)?：依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和HRP標(biāo)記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物?。

　　顯色檢測?：TMB底物在HRP催化下顯色(藍(lán)色→黃色)，顏色深度與TFR濃度正相關(guān)，450nm波長測OD值?。

　　二、試劑盒組成?

　　預(yù)包被微孔板

　　TFR標(biāo)準(zhǔn)品(濃度范圍通常為15.63–1000 pg/mL)?

　　HRP標(biāo)記檢測抗體、TMB底物、終止液

　　洗滌緩沖液(20×濃縮液需稀釋)?

　　封板膜(一次性使用)?

　　三、樣本處理?

　　血清/血漿?：離心(3000×g，10分鐘)去除顆粒，避免溶血?。

　　細(xì)胞上清/組織勻漿?：離心(1000–3000×g，10分鐘)取上清?。

　　保存?：分裝后-20℃凍存，避免反復(fù)凍融?。

　　四、操作步驟?

　　平衡試劑?：冷藏試劑需室溫平衡15–30分鐘?。

　　加樣?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議做復(fù)孔?。

　　高濃度樣本需稀釋(計(jì)算時(shí)乘以稀釋倍數(shù))?。

　　孵育?：37℃避光反應(yīng)，嚴(yán)格計(jì)時(shí)(通常30–60分鐘)?。

　　洗滌?：使用洗板機(jī)或手動(dòng)洗板，拍干?。

　　顯色與終止?：

　　加入TMB避光顯色(10–15分鐘)?。

　　終止后30分鐘內(nèi)檢測OD值?。

　　五、注意事項(xiàng)?

　　質(zhì)量控制?：每次實(shí)驗(yàn)需同步繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?。

　　避免污染?：

　　使用一次性槍頭，不同批號試劑勿混用?。

　　封板膜不可重復(fù)使用?。

　　儀器校準(zhǔn)?：定期校驗(yàn)移液器精度(誤差≤2%)?。

　　安全處理?：所有廢棄物按生物危害物處置?。

　　六、常見問題?

　　洗滌液結(jié)晶?：溫水浴助溶，不影響效果?。

　　顯色異常?：檢查底物避光保存及HRP活性?。

　　注：以上資料僅供參考，如需進(jìn)一步技術(shù)支持，可聯(lián)系供應(yīng)商獲取服務(wù)或?qū)嶒?yàn)指導(dǎo)?。

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